如果灌注成功,小心轉移動物尸體到潔凈托盤中,透射電鏡zui好用浸濕固定液的雙層紗布仔細覆蓋動物,再覆蓋一層保鮮膜,室溫等待1h,(等待1h的目的是使組織充分定型、硬化,減少手術切割時產生的機械損傷,不確定是否灌注成功時可不等待立即取材,4植物組織,植物組織取材需注意時間因素,用包埋樹脂或其混合液逐漸取代組織內的脫水劑,細胞內外所有的空隙被滲透填充,使包埋劑逐步滲透到組織細胞內部,以便與細胞外的包埋劑同時聚合。
小鼠建議液量30ml,大鼠至少100ml,貓約500ml,透射電鏡并以此估計其他小動物用量,(8)固定液灌注過程中,觀察動物肢體是否充分僵硬,黏膜、內臟等是否充分褪去血色,如果灌注液用量過半仍沒有這些現象,立即終止灌注,行搶救性切割取材,(9)灌注完成后,撤去灌注器械,分辨率為該透射電鏡理論上能分辨zui小尺寸的能力極限,表示拍攝照片中單個像素點對應實際尺寸的大小,與放大倍數聯合表示了電鏡照片中相關細微結構的區分能力。
生物樣品TEM各實驗步驟要求,取材和預固定,透射電鏡動物普通組織,一般動物組織的取材,要點一是減少缺血缺氧時間,二是減少機械損傷,麻醉或斷頸處死均可,可根據實驗目的和條件選擇,具體如下:請盡快用戊二醛固定液預固定,如圖5所示,對圖片做選取傅里葉變換,選擇第二種校正方法,出現的變換結果中,選種對應的變換對稱點,點擊ok,出現的對話框中,填入對應晶面的1/d數值,并將單位改為1/nm,點擊ok即可。