透射電子顯微鏡(TEM)是研究材料微結(jié)構(gòu)zui直接的表征技術(shù)之一,能夠在納米到原子尺度對(duì)材料微結(jié)構(gòu)進(jìn)行成像與分析,目前,透射電鏡應(yīng)用于材料的電學(xué)參數(shù)表征方法可以分為兩大類:一類為宏觀尺度技術(shù),比如四點(diǎn)探針法或范德堡法,光學(xué)測(cè)量等,允許快速檢測(cè),但只能提供直流電導(dǎo)率等單一參數(shù)信息,另一類為納米尺度的技術(shù),如拉曼光譜、原子力顯微鏡、掃描電鏡、透射電鏡等,能夠得到分辨率很高的圖像,然而通常需要復(fù)雜的樣品制備步驟,并且測(cè)量速度十分緩慢,無法實(shí)現(xiàn)高速測(cè)量。
小鼠建議液量30ml,大鼠至少100ml,貓約500ml,透射電鏡并以此估計(jì)其他小動(dòng)物用量,(8)固定液灌注過程中,觀察動(dòng)物肢體是否充分僵硬,黏膜、內(nèi)臟等是否充分褪去血色,如果灌注液用量過半仍沒有這些現(xiàn)象,立即終止灌注,行搶救性切割取材,(9)灌注完成后,撤去灌注器械,分辨率為該透射電鏡理論上能分辨zui小尺寸的能力極限,表示拍攝照片中單個(gè)像素點(diǎn)對(duì)應(yīng)實(shí)際尺寸的大小,與放大倍數(shù)聯(lián)合表示了電鏡照片中相關(guān)細(xì)微結(jié)構(gòu)的區(qū)分能力。
生物樣品TEM各實(shí)驗(yàn)步驟要求,取材和預(yù)固定,透射電鏡動(dòng)物普通組織,一般動(dòng)物組織的取材,要點(diǎn)一是減少缺血缺氧時(shí)間,二是減少機(jī)械損傷,麻醉或斷頸處死均可,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蜅l件選擇,具體如下:請(qǐng)盡快用戊二醛固定液預(yù)固定,如圖5所示,對(duì)圖片做選取傅里葉變換,選擇第二種校正方法,出現(xiàn)的變換結(jié)果中,選種對(duì)應(yīng)的變換對(duì)稱點(diǎn),點(diǎn)擊ok,出現(xiàn)的對(duì)話框中,填入對(duì)應(yīng)晶面的1/d數(shù)值,并將單位改為1/nm,點(diǎn)擊ok即可。