夾持劍突，將胸廓整體向頭端外翻并固定，充分暴露心臟，（此步為灌注操作的關鍵，針尖務必留在左心室，如果發現穿破室間隔、房室隔或心壁，須繼續小心進針，直到針頭進入升主動脈，然后仍夾持心臟，），灌注預熱到體溫的生理鹽水，同時剪破右心耳放血，直到右心耳流出的液體基本不帶血色，zui好刮取細胞，收集在離心管中，1500rpm離心10min（該參數可按自己的經驗調整，目的是不損傷細胞結構的情況下去掉培養液成分）。

小型實驗動物的腦深部組織、脊髓等不易快速取出固定的標本，或需要大范圍、多器官取材時，可采用經心臟灌注固定，透射電鏡固定液zui好采用2%多聚甲醛+2，5%戊二醛，需要保全心臟相關結構的實驗，或者要觀察肺組織充氣形態的實驗禁用經心臟灌注的方法，具體步驟如下：，這些數據的二次分析成為研究工作分析和論文撰寫的重要部分，尤其是高倍透射圖片，通過后處理可獲得很多充分的數據性結果，能夠為結構和機理等的深入分析提供有力證據。

生物樣品TEM各實驗步驟要求，取材和預固定，透射電鏡動物普通組織，一般動物組織的取材，要點一是減少缺血缺氧時間，二是減少機械損傷，麻醉或斷頸處死均可，可根據實驗目的和條件選擇，具體如下：請盡快用戊二醛固定液預固定，如圖5所示，對圖片做選取傅里葉變換，選擇第二種校正方法，出現的變換結果中，選種對應的變換對稱點，點擊ok，出現的對話框中，填入對應晶面的1/d數值，并將單位改為1/nm，點擊ok即可。