夾持劍突，將胸廓整體向頭端外翻并固定，充分暴露心臟，（此步為灌注操作的關鍵，針尖務必留在左心室，如果發現穿破室間隔、房室隔或心壁，須繼續小心進針，直到針頭進入升主動脈，然后仍夾持心臟，），灌注預熱到體溫的生理鹽水，同時剪破右心耳放血，直到右心耳流出的液體基本不帶血色，zui好刮取細胞，收集在離心管中，1500rpm離心10min（該參數可按自己的經驗調整，目的是不損傷細胞結構的情況下去掉培養液成分）。

動物組織zui好在離體后1min內開始固定，透射電鏡非灌注的組織，厚度不超過4mm，請用恰當方式（比如切成寬薄片）體現位置和層次關系，請盡量不要事先切成很小的顆粒請用鋒利薄刀片切組織，朝一個方向劃，不要來回切割，不要擠壓、拉扯，含有食物殘渣、大量血液或其它黏附物的組織，請用生理鹽水漂洗，再投入預固定液，zui初的30min以后，zui好在4℃的固定液中浸泡，嚴禁結冰（太靠近冰箱后壁或冰袋運輸都可能使組織結冰，冬季寧可常溫送樣）。

生物樣品TEM各實驗步驟要求，取材和預固定，透射電鏡動物普通組織，一般動物組織的取材，要點一是減少缺血缺氧時間，二是減少機械損傷，麻醉或斷頸處死均可，可根據實驗目的和條件選擇，具體如下：請盡快用戊二醛固定液預固定，如圖5所示，對圖片做選取傅里葉變換，選擇第二種校正方法，出現的變換結果中，選種對應的變換對稱點，點擊ok，出現的對話框中，填入對應晶面的1/d數值，并將單位改為1/nm，點擊ok即可。