透射電子顯微鏡(TEM)是研究材料微結(jié)構(gòu)zui直接的表征技術(shù)之一,能夠在納米到原子尺度對材料微結(jié)構(gòu)進(jìn)行成像與分析,目前,透射電鏡應(yīng)用于材料的電學(xué)參數(shù)表征方法可以分為兩大類:一類為宏觀尺度技術(shù),比如四點(diǎn)探針法或范德堡法,光學(xué)測量等,允許快速檢測,但只能提供直流電導(dǎo)率等單一參數(shù)信息,另一類為納米尺度的技術(shù),如拉曼光譜、原子力顯微鏡、掃描電鏡、透射電鏡等,能夠得到分辨率很高的圖像,然而通常需要復(fù)雜的樣品制備步驟,并且測量速度十分緩慢,無法實(shí)現(xiàn)高速測量。
動物組織zui好在離體后1min內(nèi)開始固定,透射電鏡非灌注的組織,厚度不超過4mm,請用恰當(dāng)方式(比如切成寬薄片)體現(xiàn)位置和層次關(guān)系,請盡量不要事先切成很小的顆粒請用鋒利薄刀片切組織,朝一個(gè)方向劃,不要來回切割,不要擠壓、拉扯,含有食物殘?jiān)?、大量血液或其它黏附物的組織,請用生理鹽水漂洗,再投入預(yù)固定液,zui初的30min以后,zui好在4℃的固定液中浸泡,嚴(yán)禁結(jié)冰(太靠近冰箱后壁或冰袋運(yùn)輸都可能使組織結(jié)冰,冬季寧可常溫送樣)。
生物樣品TEM各實(shí)驗(yàn)步驟要求,取材和預(yù)固定,透射電鏡動物普通組織,一般動物組織的取材,要點(diǎn)一是減少缺血缺氧時(shí)間,二是減少機(jī)械損傷,麻醉或斷頸處死均可,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蜅l件選擇,具體如下:請盡快用戊二醛固定液預(yù)固定,如圖5所示,對圖片做選取傅里葉變換,選擇第二種校正方法,出現(xiàn)的變換結(jié)果中,選種對應(yīng)的變換對稱點(diǎn),點(diǎn)擊ok,出現(xiàn)的對話框中,填入對應(yīng)晶面的1/d數(shù)值,并將單位改為1/nm,點(diǎn)擊ok即可。